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真菌重測序
產(chǎn)品概述
基因組重測序是對已知的基因組進行測序,并對個體或者群體樣品進行分析。真菌重測序可以輔助研究者發(fā)現(xiàn)真菌單核苷酸多態(tài)性位點(SNPs)、插入(Insertion)、缺失(Deletion)等變異類型,將單個參考基因組信息擴增為生物群體的遺傳特征。通過雙末端(Paired-End)測序,檢測基因序列間的位點差異和結(jié)構(gòu)變異,在全基因組水平上解釋導致性狀差異的原因。
產(chǎn)品優(yōu)勢
高性價比:低價獲得50× coverage 的全基因組數(shù)據(jù)
優(yōu)質(zhì)服務(wù):豐富的項目經(jīng)驗,提供全面準確的基因組解析結(jié)果
產(chǎn)品應(yīng)用
病原真菌致病因子分析
食用/藥用真菌功能基因挖掘
群體進化研究
案例一:基因組+轉(zhuǎn)錄組研究稻瘟病菌98-06新的致病元件,揭示基因組進化的動態(tài)過程
Global Genome and Transcriptome Analyses of Magnaporthe oryzae Epidemic Isolate 98-06 Uncover Novel Effectors and Pathogenicity-Related Genes, Revealing Gene Gain and Lose Dynamics in Genome Evolution. (PLoS Pathog. 2015)
? ? ? ?通過基因組和轉(zhuǎn)錄組對水稻敏感病原稻瘟病菌98-06進行研究,發(fā)現(xiàn)與參考菌株70-15相比,該菌株有1.4Mb的特異性基因序列。全基因組表達譜測序發(fā)現(xiàn)134個效應(yīng)因子,其中兩個效應(yīng)因子Iug6和Iug9以及一個新的致病性相關(guān)基因產(chǎn)物Iug18是主要功能相關(guān)因子。研究發(fā)現(xiàn)Iug6和Iug9存在于BIC(biotrophic interfacial complex),這兩個基因的過量表達會抑制水稻相關(guān)抗性基因表達。該研究在一定程度上支持了“孤立基因是病原基因多樣性來源”的假設(shè),同時也為更深入的研究稻瘟病菌的效應(yīng)因子和致病基因變異提供依據(jù)。
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圖1. 98-06和70-15基因組比較
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圖2. 稻瘟病菌感染后不同時間水稻不同信號通路基因表達譜

圖3. RNA-seq檢測不同稻瘟病菌致病基因及元件表達情況
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案例二:高雜合、高重復的小麥條繡真菌基因組研究
High genome heterozygosity and endemic genetic recombination in the wheat stripe rust fungus.( Nat Commun. 2013 )
? ? ? 小麥條銹病是一種危害嚴重的農(nóng)作物疾病,本研究選擇小麥條銹病的病原菌小麥條銹菌Pst(Puccinia striiformis f. sp. tritici) isolate CY32進行測序,通過”fosmid-to-fosmid”測序組裝得到110Mb的基因圖譜,并對其物種進化和致病機理進行研究。研究發(fā)現(xiàn)Pst是高度雜合基因組,包含25,288個蛋白編碼基因。與條件致病菌相比,Pst具有更多的基因元件,編碼更多的分泌蛋白。對6株來自不同地區(qū)的菌株進行重測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)Pst具有較高的基因多樣性,在基因編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)約35%的SNPs,其中有一半為非同義突變。該研究采用 ”fosmid-to-fosmid” 策略得到了較好的雙核基因組組裝結(jié)果,并對病原菌物種進化及致病機理研究提供重要的依據(jù)。

圖1. Pst基因組雜合區(qū)域通過對Pst-CY32 Illumina測序組裝結(jié)果與Sanger測序結(jié)果進行校正,發(fā)現(xiàn)雜合區(qū)域;將重測序結(jié)果與Pst-CY32參考基因組比對,檢測SNP和SNV變異

圖2. 7株P(guān)st菌株相互關(guān)系分析a, 根據(jù)不同菌株毒力大小對17個菌株,7個隔離群進行熱圖分析;b, 根據(jù)SNP分析結(jié)果分析7個菌群間的進化關(guān)系
DNA樣本
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樣本類型 |
總量 |
濃度 |
完整性(膠圖) |
純度 |
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基因組DNA |
1 μg |
12.5 ng/μl |
主峰>20Kb |
無蛋白,RNA/鹽離子等污染,樣本無色透明不粘稠 |

